Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (sonder Sampling Tools) Protokol
Kit beskrywing:
Gebruik diereweefsel-lisaat direk as 'n templaat vir PCR-amplifikasie, sonder aparte ekstraksie van DNA, vinnig en hoë sensitiwiteit.Bygevoeg UNG anti-besoedeling stelsel om vals positiewe uit te skakel.
◮Geen tydrowende en duur DNS-suiwering is nodig nie.
◮Die monsteraanvraag is klein, neem net 'n enkele saadjie.
◮Geen spesiale behandelings soos maal en vergruis word benodig nie, en die operasie is eenvoudig.
◮Die geoptimaliseerde PCR-stelsel stel PCR in staat om hoër spesifisiteit en sterker verdraagsaamheid teenoor PCR-reaksie-inhibeerders te hê.
Beskrywings
Hierdie stel gebruik 'n unieke lysisbufferstelsel om genomiese DNA vinnig uit diereweefselmonsters vry te stel vir PCR-reaksies, so dit is veral geskik vir grootskaalse genetiese toetsing.
Die proses van vrystelling van genomiese DNA vanaf die lisisbuffer word binne 10-30 minute by 65°C voltooi.Geen ander prosesse soos proteïen- en RNA-verwydering word vereis nie, en die vrygestelde spoor-DNS kan as templaat vir PCR-reaksie gebruik word.
2×PCR MaklikTMMeng (UNG) gebruik dUTP in plaas van dTTP op die basis van 2×PCR EasyTMMeng en voeg UNG-ensiem (Uracil-N-glikosilase) by wat die sjabloon wat dUTP bevat terselfdertyd kan afbreek.Voor die PCR-reaksie word die UNG-ensiem gebruik om die PCR-produk wat uracil bevat, af te breek.Die UNG-ensiem sal geen effek hê op die sjabloon wat nie urasiel bevat nie, om sodoende die spesifisiteit en akkuraatheid van amplifikasie te verseker en die moontlikheid van PCR produkte kontaminasie tydens grootskaalse genetiese toetsing te voorkom.
D-Taq DNA-polimerase is 'n DNA-polimerase wat spesiaal deur Foregene ontwikkel is vir direkte PCR-reaksies.D-Taq DNA-polimerase het sterk verdraagsaamheid teenoor 'n verskeidenheid van PCR-reaksie-inhibeerders, en kan spoorhoeveelhede DNA doeltreffend in verskeie komplekse reaksiestelsels versterk, en die amplifikasiespoed kan 2Kb/min bereik, wat veral geskik is vir Direkte PCR-reaksie.
Kit komponente
| Deel I | Buffer AL |
| Voorgene Protease | |
| 6× DNA-laaibuffer | |
| Deel II | 2×PCR MaklikTMMeng (UNG) |
Kenmerke en voordele
■Geen tydrowende en duur DNA-suiwering nie
■ Die monsteraanvraag is klein, so min as 5mg diereweefsel kan getoets word.
■ Geen spesiale behandeling soos maal en vergruis word benodig nie, en die operasie is eenvoudig.
■ Geoptimaliseerde PCR-stelsel maak dat PCR hoër spesifisiteit en sterker toleransie vir PCR-reaksie-inhibeerders het.
■ Anti-besoedeling PCR-stelsel 2×PCR MaklikTMMeng (UNG) elimineer effektief die besoedeling wat deur PCR-produkte veroorsaak word en verseker die spesifisiteit en akkuraatheid van amplifikasie.
Stel parameters
Toepassing: 'n verskeidenheid diereweefsels.
DNA vrygestel van monster lisis: slegs gebruik as 'n PCR-sjabloon.
Die stel kan vir die volgende doeleindes gebruik word: identifikasie van transgenose, diere genotipering, ens.
Werk vloei
Berging en raklewe
Deel I van hierdie stel moet by 2-8 gestoor word℃.
Die reagens Buffer AL kan vir 12 maande onder droë toestande gestoor word;dit kan op 2-8 gestoor word℃vir langer berging.
Reagens Foregene Protease het 'n unieke formule.Om sy aktiwiteit en stabiliteit te verseker, stoor dit asseblief by 4℃vir 12 maande.
Reagens 6×DNA-laaibuffer kan by 4 gestoor word℃of -20℃vir 'n lang tyd.
Deel II van hierdie stel moet by -20 gestoor word℃.
Reagens 2×PCR MaklikTMMeng(UNG), as dit gereeld gebruik word, kan dit ook op 4 gestoor word℃vir korttermynberging (gebruik binne 10 dae).
