• facebook
  • gekoppel
  • youtube

Inleiding:

RNA, wetenskaplike naam ribonukleïensuur, sy afkorting kom van RiboNukleinsuur, is 'n tipe nukleïensuur wat gevorm word deur ten minste dosyne ribonukleotiede deur fosfodiesterbindings te verbind.

Die uitgangspunt van die ondersoek van RNA is om besoedelingsvrye Total RNA te onttrek, en die basiese beginsel van RNA-onttrekking kan rofweg soos volg opgesom word:

1. Ontwrig eers die selle

2. Verwyder dan makromolekulêre onsuiwerhede (proteïene, lipiede, DNA, ens.)

3. Laastens word die RNA gepresipiteer terwyl soute en organiese oplosmiddels verwyder word, en die RNA verder suiwer

Verlede en hede van onttrekking metode

Die eerste generasie RNA-ekstraksiemetode is die TRIzol-presipitasiemetode (reagense wat gebruik word sluit in guanidien isothiocyanate, fenol, chloroform, ens.) uitgevind deur 'n oupa genaamd Piotr Chomczynski en ouma Nicoletta Sacchi, want hierdie uitvinding laat RNA-ekstraksie toe Vinnig en maklik, sedertdien het die RNA-navorsing begin.

fjghj

Later het Oupa hierdie patent aan Invitrogen verkoop, en Invitrogen het hierdie metode aan die wêreld bevorder en 'n wyd gebruikte metode geword.

Later is Invitrogen deur Thermo!

Verteenwoordigende produk: Invitrogen se TRIzol-reagens

cjgh

Die TRIzol-presipitasiemetode vereis egter veelvuldige presipitasie en ekstraksie van RNA, en die reagense wat gebruik word is giftig en neem lank om te werk.

Daarom het die tweede generasie kolom-ensiem suiweringsmetode tot stand gekom, met behulp van silikagel membraan as 'n spesifieke nukleïensuur adsorpsie materiaal om die herwinning van RNA in die monster te maksimeer terwyl ander onsuiwerhede verwyder word.

Die tweede generasie metode vereenvoudig die operasie op grond van stabiele prestasie, verminder die risikofaktor en verbeter die doeltreffendheid van RNA-ekstraksie.

Verteenwoordigende produkte: QIAGEN RNMaklik en die meeste huishoudelike produkte

ghjfgh

Beide die eerste en tweede generasie metodes vereis egter die gebruik van DNase om DNA-kontaminasie te verwyder, wat 'n mate van ongerief meebring vir daaropvolgende stroomaf-eksperimente.Residuele DNase sal die doeltreffendheid van omgekeerde transkripsie verminder en die eerste-string cDNA sintese verminder, waardeur die akkuraatheid van die resultate beïnvloed word.

Daarom word die derde generasie onttrekkingsmetode geoptimaliseer op grond van die tweede generasie.Die eksperiment hoef nie enige ensieme by te voeg nie, en RNA kan maklik met slegs twee kolomme verkry word.

Kolom 1: DNS-skoonmaakkolom om DNS skoon te maak

Kolom 2: Slegs RNA Kolom adsorbeer en herwin spesifiek RNA

So 'n eenvoudige operasie spaar nie net tyd nie, maar vergemaklik ook die werking van stroomaf-eksperimente!

Verteenwoordigende produkte: QIAGEN RNeasy Plus enVoorgeneRNA suiwering reeks produkte

cgjfgj

(RNeasy Plus)

vghjgh

(Foregene s'nPlant totale RNA-isolasiestel)

Vertel jou rustig!Foregene se RNA-stel bied ook 'n super maklik-om-te gebruik RNase Eraser, wat 400μg RNase heeltemal op die vaste oppervlak in 1 minuut kan verwyder, sonder om enige giftige stowwe by die menslike liggaam te voeg!

Foto1: Operasionele proses vergelyking grafiek

cjcgh

Foregene se produkte kan RNA-ekstraksie in net twee liedjies voltooi, moenie ander jaloers maak op jou eksperimentvordering nie!

Foto2:Eeksperimentele resultate vergelyking grafiek

Die eerste generasie (1: TRIzol)

Die tweede generasie (2: RNeasy of QIAGEN)

Die derde generasie (3: QIAGEN se RNeasy plus, 4: Foregene)

ghjk

Foto3: qPCR-grafiek (versterkingskrommegrafiek)

Die eerste generasie (groen beteken TRIzol -, rooi beteken TRIzol +)

jhkgjhfg

Die tweede generasie (hemelblou beteken QIAGEN RNeasy-, rooi beteken QIAGEN RNeasy +)

cjh1

Die derde generasie (blou beteken QIAGEN RNeasy plus, groen beteken Foregene)

fgjgy2

(Let wel: qPCR grafiek "-" dui aan dat DNase nie bygevoeg is nie en DNA kontaminasie nie verwyder is nie. Daarom is die CT hoër en die resultaat is nie akkuraat nie; "+" dui aan dat DNase bygevoeg is en die DNA kontaminasie verwyder is, die resultaat is akkuraat)

Elke tegniese opgradering beteken dat die werking van die eksperiment in 'n eenvoudiger en meer gebruikersvriendelike rigting ontwikkel.

Foregene het ten doel om meer wetenskaplike navorsers te help om eksperimentele tyd en koste te bespaar, eksperimentele resultate van hoë gehalte te verkry en gesamentlik meer waardevolle wetenskaplike navorsingsprestasies te skep.


Postyd: Jul-09-2021