Gebruik jy nog steeds Trizol om RNA te onttrek?
Sjoe, moenie dat ek my oor jou gesondheid bekommer nie!
Trizol is op die punt om gemarginaliseer te word, moenie vir my sê jy is nog in die duister nie?

Die hoofkomponent van Trizol-reagens is fenol, en organiese reagense soos chloroform word ook in die eksperimentele operasie bygevoeg.Langtermyn blootstelling sal skade aan jou gesondheid veroorsaak, veral direkte velkontak kan ernstige chemiese brandwonde en permanente letsels veroorsaak.

Onder normale omstandighede kan die laboratoriumvennote slegs die gevare verminder deur hulself ten volle te bewapen (laboratoriumjasse, handskoene en maskers te dra).

En my raad aan jou is: vervang asseblief Trizol direk om skade deur die bron te vermy.

1. Die eerste generasie produk van RNA-ekstraksie
Kom uit in 1987 (Trizol-reagense)

voordeel:
Meer volledige onttrekking

Nadele:
Giftige reagense soos guanidien isotiosianaat-fenol-chloroform word benodig;
Omslagtige operasie;
Moet DNase gebruik om DNA-kontaminasie te verwyder

2.Die tweede generasie produk van RNA-ekstraksie
Kom uit in 1994 (QIAGEN RNeasy en meeste huishoudelike produkte)

voordeel:
Kolom sentrifugale metode word aangeneem, wat maklik is om te bedryf;

Nadeel:
Moet sentrifugeer om weefselrommel te verwyder
Moet DNase gebruik om DNA-kontaminasie te verwyder

3.Die derde generasie produk van RNA-ekstraksie
Kom uit in 2005 (QIAGEN RNeasy Plus en ForegeneRNA suiwering reeks produkte)

voordeel:
Gebruik DNS-verwyderingskolom direk om DNS en weefselafval op dieselfde tyd te verwyder, wat tyd en moeite bespaar;
Veilig en gerieflik, nie nodig om filterkolom en DNase by te voeg om onsuiwerhede maklik te verwyder en DNA-besmetting te vermy nie

Kom ons kyk na die operasionele verskille tussen die eerste generasie produk (Trizol), die tweede generasie produk (RNeasy) en die derde generasie produk (Foregene) van RNA ekstraksie:

Die werking in die figuur is duidelik: die derdegenerasieproduk het ooglopende voordele

Net drie woorde om te beskryf: maklik!Vinnig!Veiligheid

Die PK-kaart van die eksperimentele resultatevirdie eerste generasie, tweede generasie en derde generasie produkte van RNA ekstraksie:

1. Elektroforetogram

Die eerste generasie (1: Trizol)
Die tweede generasie (2:QIAGEN RNMaklik)
Die derde generasie (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Vorige)

Watter soort produk goed is, sal jy in vergelyking weet
RNA onttrek met behulp van die Foregene-stel
Nie net hoë konsentrasie nie, maar ook goeie integriteit

2.qPCR-grafiek (versterkingskrommegrafiek)

Die eerste generasie (Trizol)

Die tweede generasie (hemelbloubetekenQIAGEN RNMaklik-, rooibetekenQIAGEN RNeasy +)

Die derde generasie (blou beteken Foregene, groen beteken QIAGEN RNeasy plus)

(Let wel: Die tweede generasie QIAGEN RNeasy van qPCR grafiek beteken dat die stel nie DNase byvoeg nie en nie DNA kontaminasie verwyder nie. Daarom is die CT hoër en die resultaat is nie akkuraat nie; QIAGEN RNeasy + beteken dat DNase bygevoeg is en die DNA kontaminasie verwyder is, en die resultaat is akkuraat)

Of dit nou 'n elektroforetogram of 'n kwantitatiewe PCR amplifikasie kurwe grafiek is, die kwaliteit van Foregene produkte is nie minderwaardig as buitelandse ingevoerde produkte nie.