Die bou van SOP-stelsel

Vestig PCR-eksperiment-SOP om die gedrag van eksperimentpersoneel te standaardiseer.

Die eksperimenteerders hou streng by die bedryfsprosedures en minimaliseer die PCR-besoedeling wat deur menslike faktore veroorsaak kan word of die voorkoms van besoedeling in die operasie voorkom.Daarbenewens moet die eksperimenteerder oor die ooreenstemmende professionele kennis en vaardighede beskik, insluitend vaardigheid in die bedryf van verwante toerusting, die opheldering van die hele werkproses, die bemeestering van die behandelingsmetodes van kontaminasie en laboratoriumgehaltebeheermetodes, en om die toetsresultate korrek te interpreteer.

Bou Standaard PCR Laboratorium

Die PCR-laboratorium word in beginsel in vier areas verdeel, naamlik reagensvoorbereidingsarea, monsterverwerkingsarea, amplifikasie area en amplifikasie produk analise area.Die eerste twee areas is voorversterkingsareas, en die laaste twee areas is naversterkingsareas.Die voorversterkingsone en die naversterkingsone moet streng geskei word.Eksperimentele materiaal, reagense, optekenpapier, penne, skoonmaakmateriaal, ens. kan slegs van die voorversterkingsarea na die naversterkingsarea vloei, dit wil sê vanaf die reagensvoorbereidingsarea, monsterverwerkingsarea, versterkingsarea en amplifikasieprodukontledingsarea, en moet nie in die omgekeerde rigting vloei nie.Die lugvloei in die laboratorium moet ook van die voorversterkingsarea na die naversterkingsarea vloei, nie in die omgekeerde rigting nie.

Verminder eksperimentele stappe

Indien die laboratorium slegs PCR-opsporing en -identifikasie uitvoer, word dit aanbeveel om fluoresserende kwantitatiewe PCR in plaas van konvensionele PCR te gebruik.

Fluoresensie kwantitatiewe PCR opsporing resultate kan versamel en ontleed word deur fluoresserende seine, so dit is nie nodig om die deksel oop te maak vir elektroforese na die reaksie nie, wat die kontaminasie van PCR produkte vermy wat veroorsaak word deur die lekkasie van reaksie produkte om aërosols te vorm.As jy die aantal dopopeninge tydens die laaistap van gelelektroforese verhoog, sal aërosolbesmetting waarskynlik plaasvind.Dit word aanbeveel om die toepassing van kwantitatiewe PCR te bevorder en kwalitatiewe PCR geleidelik te vervang.

Neem UNG-teenbesoedelingstelsel aan

Die UNG anti-PCR produk kontaminasie stelsel word gebruik vir die PCR reaksie.

Die stelsel gebruik dUTP in plaas van dTTP.Na die PCR-reaksie word alle PCR-produkte (DNA-fragmente) by dUTP geïnkorporeer;in die volgende rondte van PCR-reaksie, word die UNG-ensiem wat by die sisteem gevoeg word, vir 5 minute by 37°C geïnkubeer voor PCR, wat spesifiek kan wees Degradeer alle DNA-fragmente wat dUTP bevat, en voer dan PCR-reaksie uit.Dit kan die aërosolbesoedeling wat deur PCR-produkte veroorsaak word, heeltemal verwyder.Die effek word in die onderstaande figuur getoon:

Let wel: Vir die direkte PCR-reeks kan u die reeksprodukte van die anti-PCR-produkbesoedelingstelsel van FJ Biotech kies

Stel voor

Vir laboratoriums wat grootskaalse genotiperingstoetse uitvoer, word dit sterk aanbeveel om die UNG anti-PCR produk kontaminasiestelsel te gebruik vir die toets van reagense bykomend tot die konstruksie van redelike laboratoriums.

Onthou: Die gebruik van hierdie stelsel kan nie die PCR-produkbesoedeling wat reeds veroorsaak is, verwyder nie.Daarom moet die UNG-stelsel aan die begin van die betrokke toets gebruik word, en die UNG-stelsel moet altyd vir PCR-amplifikasie gebruik word, om sodoende die kontaminasie van PCR-produkte te voorkom.Vals positief.

Dit word aanbeveel om die Direct PCR-UNG-stelsel van Forge Biotech te gebruik wanneer grootskaalse toetse uitgevoer word, soos: Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG;

Plant Saad Direct PCR Kit-UNG；

Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG；

Muisstert Direct PCR Kit-UNG；

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.

Hierdie reeks kits van Foregene kan nie net PCR-opsporing vinnig en op groot skaal uitvoer nie, maar ook effektief PCR-produkbesoedeling voorkom en beheer.