Plant DNA Isolasie Kit Genomiese Plant DNA Suiwering Kits Reagense Protokol
Spesifikasies
50 voorbereidings, 100 voorbereidings, 250 voorbereidings
Hierdie stel gebruik 'n DNS-alleen-kolom wat spesifiek DNS, Foregene-protease en 'n unieke bufferstelsel kan bind, wat die suiwering van plantgenomiese DNS aansienlik vergemaklik.Hoë gehalte genomiese DNA kan binne 30 minute verkry word, wat die afbraak van genomiese DNA vermy.
Die DNA-enigste silikagel-membraan wat in die spinkolom gebruik word, is Foregene se unieke nuwe materiaal, wat effektief en spesifiek aan DNA kan bind, en die verwydering van RNA, onsuiwerheidsproteïene, ione, polisakkariede, polifenole en ander organiese verbindings maksimeer.
Produk komponente
| Buffer PL1, Buffer PL2 |
| Buffer PW, Buffer WB, Buffer EB |
| Voorgene Protease |
| Slegs DNA-kolom |
| Instruksies |
Kenmerke en voordele
■ Geen RNase-kontaminasie: Die DNS-Slegs-kolom wat deur die stel verskaf word, maak dit moontlik om RNA uit genomiese DNA te verwyder sonder bykomende RNase tydens die eksperiment, wat verhoed dat die laboratorium deur eksogene RNase besmet word.
■ Vinnige spoed: Foregene Protease het hoër aktiwiteit as soortgelyke proteases en verteer weefselmonsters vinniger.
■ Eenvoudig: die genomiese DNS-ekstraksie-operasie kan binne 30 minute voltooi word.
■ Gerieflik: Die sentrifugering word by kamertemperatuur uitgevoer, geen 4℃ laetemperatuur sentrifugering of etanolpresipitasie van DNA word vereis nie.
■ Veiligheid: geen organiese reagens word benodig nie.
■ Hoë kwaliteit: Die gesuiwerde genomiese DNA het groot fragmente, geen RNA, geen RNase nie, en uiters lae iooninhoud, kan aan die vereistes van verskeie eksperimente voldoen.
Kit aansoek
Geskik vir ekstraksie en suiwering van genomiese DNA uit vars of bevrore plantweefsels.
Werk vloei
Diagram
Berging en raklewe
Die stel kan vir 12 maande by kamertemperatuur (15–25 ℃) en 2–8 ℃ vir langer tyd gestoor word.
Foregene Protease Plus-oplossing het 'n unieke formule, wat aktief is wanneer dit vir 'n lang tyd (3 maande) by kamertemperatuur gestoor word;sy aktiwiteit en stabiliteit sal beter wees as dit gestoor word by4 ℃, daarom word dit aanbeveel om dit by 4 ℃ te stoor, onthou om nie by -20 ℃ te stoor nie.
Probleemontledingsgids
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.
Lae opbrengs of geen DNA
Daar is gewoonlik baie faktore wat die opbrengs van genomiese DNA beïnvloed, insluitend die bron van die monster, die ouderdom van die monster, die bergingstoestande van die monster en die werking.
Genomiese DNA kon nie tydens ekstraksie verkry word nie
1. Die weefselmonsters word onbehoorlik gestoor of te lank gestoor, wat lei tot die agteruitgang van die genomiese DNA.
Aanbeveling: Berg weefselmonsters in vloeibare stikstof of -20°C;probeer om nuut versamelde monsters vir genomiese DNA-ekstraksie te gebruik.
2. Te min monsterhoeveelheid kan veroorsaak dat die ooreenstemmende genomiese DNA nie onttrek word nie.
Voorstel: Vir weefselmonsters wat vir 'n lang tyd gestoor is of ernstige genomiese DNA-afbraak het, kan die hoeveelheid weefselmonsters gepas verhoog word om aansienlike genomiese DNA te onttrek.Die hoeveelheid van die monster kan bepaal word volgens die DNA-behoeftes, maar die vars monster moet nie 100mg oorskry nie, en die droë monster moet nie 30mg oorskry nie.
3. Die monster word nie met vloeibare stikstof gemaal of te lank na vloeibare stikstof geplaas nie.
Voorstel: Tydens DNS-ekstraksie moet die monster volledig met vloeibare stikstof gemaal word om die selwand te breek;na maal, dra asseblief die monster poeier oor na PL1 voorverhit op 65°C so gou as moontlik (sodra die gemaalde poeier gesmelt is, sal die genomiese DNA vinnig begin afbreek) .
4. Onbehoorlike berging van Foregene Protease lei tot verminderde of geïnaktiveerde aktiwiteit.
Aanbeveling: Bevestig die bergingstoestande van Foregene Protease of vervang dit met 'n nuwe Foregene Protease vir ensiematiese hidrolise.
5. Die stel word onbehoorlik gestoor of te lank gestoor, wat veroorsaak dat sommige komponente in die kit misluk.
Aanbeveling: Koop 'n nuwe plant genomiese DNA-ekstraksiestel vir verwante operasies.
6. Onbehoorlike gebruik van die kit.
Voorstel: Koop 'n Plant-DNA-isolasiestel wat toegewy is aan monsters vir ekstraksie en suiwering van plantgenomiese DNA.
7. Buffer WB sonder om 'n by te voegwatervry etanol.
Aanbeveling: Maak seker dat jy die korrekte volume absolute etanol by Buffer WB voeg.
8. Die eluent is nie korrek op die silikamembraan gedrup nie.
Voorstel: Voeg die voorverhitte eluent by 65 by℃druppelsgewys tot in die middel van die silikagel-membraan, en laat dit by kamertemperatuur vir 5 minute om die elueringsdoeltreffendheid te verhoog.
Ekstraksie om lae-opbrengs genomiese DNA te verkry
1. Die monster word onbehoorlik gestoor of te lank gestoor, wat lei tot die agteruitgang van genomiese DNA.
Aanbeveling: Stoor weefselmonsters by -20℃;probeer om nuut versamelde weefselmonsters vir genomiese DNA-ekstraksie te gebruik.
2. As die hoeveelheid weefselmonsters te klein is, sal die onttrekte genomiese DNA minder wees.
Voorstel: Sommige plantmonsters is ryk aan water, soos waterplante soos alge, ens., die dosis kan gepas verhoog word of die water kan 'n bietjie gedehidreer word voor die operasie.
3. Die monsters is nie deeglik met vloeibare stikstof gemaal nie of is te lank by kamertemperatuur gelaat na maal.
Voorstel: Die maaltyd van vloeibare stikstof moet voldoende wees, en die monsterselwand moet soveel as moontlik gebreek word;onmiddellik na die maaltyd moet die monsterpoeier na 65 oorgeplaas word℃voorverhit Buffer PL1 vir die volgende stap.
4. Gebruik nie die korrekte kit nie.
Aanbeveling: Gebruik 'n toegewyde Plant-DNA-isolasiestel om plantgenomiese DNA te onttrek en te suiwer.
5. Onbehoorlike berging van Foregene Protease lei tot verminderde of geïnaktiveerde aktiwiteit.
Aanbeveling: Bevestig die bergingstoestande van Foregene Protease of vervang dit met 'n nuwe Foregene Protease vir ensiematiese hidrolise.
6. Eluent probleem
Aanbeveling: Gebruik asseblief Buffer EB vir eluering;as jy ddH gebruik2O of ander eluente, maak seker dat die pH van die eluent tussen 7.0-8.5 is.
7. Die eluent word nie korrek gedrup nie
Voorstel: Voeg asseblief die elutie druppel by die middel van die silika membraan en laat dit by kamertemperatuur vir 5 minute om die elutie doeltreffendheid te verhoog.
8. Die eluentvolume is te klein
Voorstel: Gebruik asseblief die eluent vir genomiese DNA eluering volgens die instruksies, ten minste nie minder nie as 100μl.
Onttrek genomiese DNA met lae suiwerheid
Die lae suiwerheid van genomiese DNA sal lei tot die mislukking of swak effek van stroomaf-eksperimente, soos: die ensiem kan nie gesny word nie, en die teikengeenfragment kan nie deur PCR verkry word nie.
1. Diverse proteïenbesmetting, RNA-kontaminasie.
Ontleding: Buffer PW is nie gebruik om die kolom te was nie;Buffer PW is nie gebruik om die kolom teen die korrekte sentrifugeringspoed te was nie.
Voorstel: probeer om te verseker dat daar geen neerslag in die supernatant is wanneer die supernatant deur die kolom gevoer word nie;maak seker dat u die suiweringskolom volgens die instruksies met Buffer PW was, en hierdie stap kan nie weggelaat word nie.
2. Onreinheid ioonbesoedeling.
Ontleding: Die Buffer WB waskolom is weggelaat of slegs een keer gewas, wat gelei het tot oorblywende ioniese kontaminasie.
Aanbeveling: Maak seker dat jy twee keer was met Buffer WB volgens die instruksies om oorblywende ione soveel as moontlik te verwyder.
3. RNase kontaminasie.
Ontleding: Eksogene RNase word by die Buffer gevoeg;verkeerde wasbewerking in Buffer PW sal oorblywende RNase tot gevolg hê en stroomaf RNA eksperimentele bewerkings beïnvloed, soos in vitro transkripsie.
Voorstel: Foregene-reeks nukleïensuur-ekstraksiestelle kan RNA verwyder sonder bykomende RNase, en alle reagense in Plant DNA Isolation Kit het nie RNase nodig nie;maak seker dat u die suiweringskolom volgens die instruksies met Buffer PW was, en hierdie stap kan nie weggelaat word nie.
4. Etanolreste.
Ontleding: Nadat die suiweringskolom met Buffer WB gewas is, is geen leë buis sentrifugering uitgevoer nie.
Aanbeveling: Volg die instruksies vir behoorlike leë buis sentrifugering.
Handleiding:
Plant DNA Isolasie Kit Instruksie Handleiding
