• facebook
  • gekoppel
  • youtube
bladsy_banier

Plant Total RNA Isolation Kit Plus Total RNA Purificaiton Kit vir plant ryk aan polisakkariede en polifenole

Kit beskrywing:

 

Kat.No.RE-05021/05022/05024

 

Vir suiwering van totale RNA van algemene plantmonsters wat hoë polisakkaried- en polifenolkomponente bevat.

Onttrek vinnig hoëgehalte totale RNA uit plantmonsters met 'n hoë inhoud van polisakkariede en polifenole.

RNase-vry met behulp van DNA-skoonmaakkolom

Eenvoudig - alle bewerkings word by kamertemperatuur voltooi

Vinnig—operasie kan binne 30 minute voltooi word

Veilig—geen organiese reagens gebruik nie voorgenome krag


Produkbesonderhede

Produk Tags

Gereelde vrae

LAAI HULPBRONNE af

Spesifikasies

50 voorbereidings, 200 voorbereidings

Die stel gebruik die spinkolom en formule wat deur Foregene ontwikkel is, wat hoë-suiwer en hoë kwaliteit totale RNA doeltreffend uit verskeie plantweefsels met 'n hoë polisakkaried- of polifenole-inhoud kan onttrek.Dit verskaf die DNA-skoonmaakkolom wat genomiese DNA maklik uit die supernatant en weefsellisaat kan verwyder.RNA-alleen kolom kan RNA effektief bind.Die kit kan 'n groot aantal monsters op dieselfde tyd verwerk.

Die hele stelsel bevat nie RNase nie, dus sal die gesuiwerde RNA nie afgebreek word nie.Buffer PRW1 en Buffer PRW2 kan verseker dat die RNA wat verkry word nie deur proteïen, DNA, ione en organiese verbindings besmet is nie.

Kit komponente

Buffer PSL1, Buffer PS, Buffer PSL2

Buffer PRW1, Buffer PRW2

RNase-vry ddH2O, DNA-skoonmaakkolom

RNA-Slegs Kolom

Kenmerke en voordele

■ Werk by kamertemperatuur (15-25 ℃) deur die hele proses, sonder ysbad en lae-temperatuur sentrifugering.
■ Volledige stel RNase-vry, hoef nie bekommerd te wees oor RNA-afbraak nie.
■ Veral geskik vir die suiwering van RNA uit plantmonsters van polisakkariede en polifenole.
■ DNS-skoonmaakkolom bind spesifiek aan DNS, sodat die stel genomiese DNS-kontaminasie kan verwyder sonder om DNase by te voeg.
■ Hoë RNA-opbrengs: RNA-slegs Kolom en unieke formule kan RNA doeltreffend suiwer.
■ Vinnige spoed: maklik om te gebruik en kan binne 30 minute voltooi word.
■ Veiligheid: geen organiese reagens word benodig nie.
■ Hoë gehalte: Die gesuiwerde RNA-fragmente is van hoë suiwerheid, vry van proteïene en ander onsuiwerhede, en kan aan verskeie stroomaf eksperimentele toepassings voldoen.

Produk parameters

■ Stroomaf toepassings: eerste-string cDNA sintese, RT-PCR, molekulêre kloning, Northern Blot, ens.
■ Monster: Vars of bevrore plantweefsel van polisakkariede en polifenole
■ Dosis: 50mg plantweefsel
■ Maksimum RNA-bindingskapasiteit van suiweringskolom: 80 μg
■ Elueervolume: 50-200 μl

Kit aansoek

Dit is geskik vir die ekstraksie en suiwering van totale RNA uit vars of bevrore plantweefselmonsters (veral vars plantblaarweefsel) met hoë polisakkaried- en polifenoleinhoud.

Werk vloei

plant totale RNA-eenvoudige werkvloei

Diagram

Plant Total RNA Isolation Kit Plus 6

Plant Total RNA Isolation Kit Plus het 50mg vars blare van polisakkariede en polifenole verwerk, en 5% gesuiwerde RNA is deur elektroforese getoets.
1: Piesang
2: Ginkgo
3: Katoen
4: Granaatjie

Berging en raklewe

Hierdie stel kan vir 24 maande onder droë toestande by kamertemperatuur (15-25 ℃) gestoor word;as dit vir 'n langer tyd gestoor moet word, kan dit in 2–8 ℃ gestoor word.
Buffer PSL1 kan vir 1 maand by 4℃ geplaas word nadat β-merkapto-etanol bygevoeg is (dit word aanbeveel om dit op dieselfde tyd van die eksperiment by te voeg).


  • Vorige:
  • Volgende:

  • Die kolom geprop

    Nadat die kolom geprop is, is die RNA-opbrengs verminder of selfs onmoontlik om die RNA te suiwer, en die verkryde RNA-massa is laag.

    Algemene oorsaak-analise:

    1. Monsterpouses is nie deeglik nie.

    Monsterbreuk veroorsaak nie heeltemal dat DNS-REINIGINGSKOLOM geblokkeer word nie, terwyl dit RNA-opbrengs en kwaliteit beïnvloed.Ons beveel vinnige maal operasie in 'n voldoende vloeibare stikstof wanneer jy die monsters gebreek, Probeer om die monster selwand, selmembraan en ander weefsel te vergruis.Vir plantmonsters van poliolpolisakkariede, beveel ons aan dat jy Plant Total RNA ISOLASIEKIT PLUS gebruik.

    2. Wanneer die geskeide monster supernatant met DNA-skoonmaakkolom opgesuig word, kan die moontlike sel gefragmenteerde neerslag ingeasem word.

    Die sel-gefragmenteerde sedimente wat geneem word, sal die SLEGS-RNA-kolom veroorsaak wat geblokkeer sal word wanneer die RNA-adsorpsie-bewerking uitgevoer word (sien stap 6).Ons beveel aan dat u hierdie supernatant versigtig suig om te verhoed dat selafval gesuig word.

    3. Monster aanvanklike hoeveelheid is te veel.

    Oormatige monstergebruik sal lei tot onvolledige monsterfragmentasie of onvolledige sellise deur Buffer PSL1, wat lei tot blokkasie van die suiweringskolom tydens suiwering.Plant Total RNA Isolation Kit Elke enkele gesuiwerde bedryfsmonster is 50 mg.Vir plantmonsters van poliolpolisakkariede, beveel ons aan dat jy Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS probeer.

    4. Die temperatuur van die sentrifuge is te laag.

    Die hele RNA-isolasie- en suiweringsproses word by kamertemperatuur (20-25°C), behalwe dat die monsterweefsel deur vloeibare stikstof gebreek word. Die temperatuur van sommige kryogeniese sentrifuges is laer as 20, wat blokkasie van DNA-skoonmaakkolom en/of RNA-alleenkolom kan veroorsaak.As dit gebeur, stel die sentrifuge temperatuur op 20-25, enmaak seker dat die lysismengsel en/of die etanol-toegevoegde supernatant voorverhit is tot 37°C.

    Geen RNA onttrek of RNA-opbrengs is laag nie

    Daar is gewoonlik baie faktore wat die herwinningsdoeltreffendheid beïnvloed, soos: monster RNA-inhoud, werkingsmetode, die elueringsvolume, ens.

    Ontleding van algemene oorsake soos hieronder:

    1. 'n Ysbad of lae temperatuur (4°C) sentrifugering is tydens die operasie uitgevoer.

    Voorstel: Werk by kamertemperatuur (15-25°C) in die hele proses, moenie ysbad en lae temperatuur sentrifugering doen nie.

    2.Die RNA is afgebreek as gevolg van onbehoorlike bewaring van die monster of langtermynbewaring van die monster.

    Aanbeveling: Vars versamelde monsters moet vinnig in vloeibare stikstof gevries word, en dan vir 'n lang tyd by -80°C gestoor word, vermy herhaalde vries en ontdooiing van monsters;of week die monsters dadelik in RNA stabilisator RNAlater oplossing (diermonsters).

    3. Onvoldoende monsterfragmentasie en lisis lei tot blokkasie van die suiweringskolom.

    Voorstel: Wanneer die weefsel gemaal word, maak asseblief seker dat die weefsel voldoende gemaal is, en dra dit vinnig oor na die voorafbereide Buffer PSL1 (bevestig dat die korrekte proporsie β-ME bygevoeg is, sien stap 1 van die prosedure).

    4.Die eluent is verkeerd bygevoeg.

    Voorstel: Maak seker dat RNase-Free ddH2O in die middel van die suiweringskolommembraan gedrup word.

    5.Die korrekte volume absolute etanol is nie by Buffer PSL2 of Buffer PRW2 gevoeg nie.

    Voorstel: Volg asseblief die instruksies, voeg die korrekte volume absolute etanol by Buffer PSL2 en Buffer PRW2 en meng goed voor die stel gebruik word.

    6. Die hoeveelheid weefselmonster is onvanpas.

    Voorstel: Gebruik 50 mg weefsel per 500 μl Buffer PSL1.Die gebruik van te veel weefsel sal die hoeveelheid RNA wat onttrek word verminder en die suiwerheid van die resulterende RNA sal ook verminder word.Ons beveel sterk aan dat die aanvanklike monsterdosis nie 50 mg per RNA-ekstraksie-operasie moet oorskry nie.

    7.Onvanpaste elutievolume of onvolledige eluering.

    Voorstel: Die eluentvolume van die suiweringskolom is 50-200 μl;indien die elueringseffek nie bevredigend is nie, word dit aanbeveel om die tyd by kamertemperatuur te verleng nadat voorverhitte RNase-vrye ddH2O bygevoeg is, soos 5-10min.

    8. Die suiweringskolom het etanolresidu nadat dit met BufferPRW2 gewas is.

    Voorstel: As die leë buis vir 1 min sentrifugeer word en daar is nog etanol oor na was in Buffer PRW2, kan jy die tyd van die leë buis sentrifugering na 2 min verhoog, of die suiweringskolom vir 5 min by kamertemperatuur plaas om die oorblywende etanol heeltemal te verwyder.

    9.Die stel is verkeerd gebruik.

    Voorstel: Vir plantmonsters van polifenoliese polisakkariede kan die gebruik van algemene stelle soos Plant Total RNA Isolation Kit dalk nie ideale RNA monsters verkry nie.Ons beveel aan dat jy Plant Total RNA IsolationKit Plus gebruik, wat spesiaal ontwerp is vir polifenoliese polisakkariedplantmonsters.’n Stel spesiaal ontwikkel vir die onttrekking van RNA uit polifenol- en polisakkariedplantmonsters.

    OD260/OD280 waarde is laag

    RNA-elutie met ddH2O en gebruik vir spektrofotometerlesings lei tot lae OD260/OD280 waardes.Ons beveel aan om 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (eerder as RNase-vry ddH2O om RNA te elueer) te gebruik om relatief korrekte OD260/OD280-waardes te verkry, sien "RNA-konsentrasie- en suiweringstoetse" op bladsy 19.

    Die gesuiwerde RNA word afgebreek

    Die kwaliteit van gesuiwerde RNA hou verband met faktore soos monsterpreservering, RNase-kontaminasie en manipulasie.

    Ontleding van algemene oorsake:

    1. Weefselmonsters is nie betyds na versameling gestoor nie.

    Aanbeveling: Indien die weefselmonsters nie betyds na versameling gebruik word nie, stoor dit asseblief onmiddellik in vloeibare stikstof by lae temperatuur of dra dit oor na -80°C vir langtermynberging na vinnige vriesing in vloeibare stikstof, of dompel die monsters dadelik in RNA stabiliseerder RNAlater oplossing (diermonsters).Vir RNA-ekstraksie, probeer om vars versamelde weefselmonsters te gebruik.

    2. Herhaalde bevriesing en ontdooiing van weefselmonsters.

    Voorstel: Wanneer weefselmonsters gestoor word, is dit die beste om dit in klein stukkies te sny vir preservering, en 'n deel daarvan uit te haal wanneer dit gebruik word om die afbraak van RNA wat veroorsaak word deur herhaalde vries en ontdooiing van die monsters te vermy.

    3.RNase word in die operasiekamer ingebring of weggooibare handskoene, maskers, ens.

    Voorstel: RNA-ekstraksie-eksperimente word die beste uitgevoer in afsonderlike RNA-operasies, en die laboratoriumtafel moet voor die eksperiment skoongemaak word, en weggooibare handskoene en maskers moet tydens die eksperiment gedra word om RNA-afbraak wat veroorsaak word deur die bekendstelling van RNase tot die grootste mate te vermy.

    4.Die reagens is tydens gebruik deur RNase besmet.

    Voorstel: Vervang met 'n nuwe reeks plant totale RNA ekstraksiestelle vir verwante eksperimente.

    5. Die sentrifugebuisies en pipetpunte wat vir RNA-manipulasie gebruik word, is met RNase besmet.

    Voorstel: Maak seker dat die sentrifugeerbuise, pipetpunte, pipette, ens. wat in RNA-ekstraksie gebruik word, almal RNase-vry is.

    Instruksiehandleidings:

    Plant Total RNA Isolation Kit Plus Instruksiehandleiding

     

    Skryf jou boodskap hier en stuur dit vir ons