1: Vervang die eksperimentele voorrade betyds

Stel (NTC) negatiewe beheer op en herhaal dit baie keer.Sodra gevind word dat daar PCR-produkbesoedeling in die laboratorium is, vervang alle eksperimentele voorrade betyds.Soos: herverdun en berei die primers voor, hersteriliseer die pipetpunt, EP-buis, ddH2O, ens., vervang met 'n nuwe pipet, en leen tydelik ander laboratoriums om PCR-eksperimente uit te voer.Die gekontamineerde laboratorium moet geventileer en met ultravioletstrale bestraal word totdat die PCR-produk kontaminasie uitgeskakel is voordat met die eksperiment voortgegaan word.

2: Verleng UV-blootstellingstyd

Dit is opmerklik dat om DNA-besmetting te verwyder, gereelde ultravioletstraling met 2 uur as gewoonlik verleng moet word.Desondanks is die effek van UV-bestraling op die verwydering van klein fragmente (onder 200bp) van DNA-kontaminasie steeds nie goed nie.

Ultraviolet golflengte (nm) is oor die algemeen 254/300nm, en dit is genoeg om vir 30 minute te bestraal.Daar moet kennis geneem word dat wanneer UV gekies word om die kontaminasie van residuele PCR produkte uit te skakel, die lengte van die PCR produk en die verspreiding van basisse in die produk volgorde in ag geneem moet word.UV-bestraling is slegs effektief vir lang fragmente bo 500 bp, en het min effek op kort fragmente.

Tydens UV-bestraling sal die pirimidienbasisse in die PCR-produk dimere vorm.Hierdie dimere kan die verlenging beëindig, maar nie alle pirimidiene in die DNA-ketting kan dimere vorm nie, en UV-bestraling kan ook die dimere breek..Die mate van dimeervorming hang af van die UV-golflengte, die tipe pirimidiendimeer en die volgorde van nukleotiede aangrensend aan die dimeerplek.Daarom, as die PCR-versterkte fragmente klein is, word dit aanbeveel om die UNG anti-PCR produk kontaminasie stelsel te gebruik.

3: Algemeen gebruikte DNS-besoedelingsvangers

Aërosols word maklik gegenereer wanneer pipette bygevoeg word, wat moeilik is om te vermy, en dit sal vinnig sak.Daarom is dit ongetwyfeld 'n goeie keuse om gereeld spesiale DNS-besoedelingsvangers te gebruik om die verspreiding van DNS-besoedeling te voorkom.

4: Gebruik UNG anti-besoedelingstelsel

Nadat die PCR-produkbesoedeling verwyder is, kan die toetslaboratorium die UNG anti-PCR-produkkontaminasiestelsel gebruik om PCR-produkbesoedeling te voorkom.In algemene laboratoriums kan jy eenvoudige eksperimentele afskortings uitvoer, die PCR-produkarea streng van ander gebiede skei, sekere laboratoriumreëls en -regulasies daarstel en relevante opleiding doen om die voorkoms van PCR-produkbesoedeling te voorkom.

Aanbevelings: Die vestiging van 'n redelike PCR-laboratorium, die handhawing van 'n goeie PCR-omgewing, die formulering van standaard PCR-bedryfsprosedures en die kweek van die streng bedryfsbewustheid van eksperimenters is die sleutels om die besoedeling van PCR-eksperimente te voorkom of te verminder.