Hot-start Taq ensiem word wyd gebruik.In vergelyking met gewone DNA-polimerase, kan warmbegin-Taq-ensiem 'n mate van nie-spesifieke amplifikasie en die vorming van primerdimere effektief vermy, en kan dit die sukseskoers van teikengeenamplifikasie effektief verbeter.Veral op die gebied van genetiese toetsing is warmbegin-Taq-ensiem as 'n verpligte standaard in die bedryf geïdentifiseer, en gewone DNS-polimerase moet nie gebruik word nie.Soos uit bogenoemde gesien kan word, word warmbegin-Taq-ensieme wyd gebruik.Tans is daar baie handelsmerke van warm-start Taq-ensieme op die plaaslike mark, maar daar is nie baie warm-start Taq-ensieme van hoë gehalte nie.Gekonfronteer met soveel warm-start Taq ensiem produkte, hoe moet ons kies?

1. Kies die warmbegin-Taq-ensiem met hoë amplifikasie-doeltreffendheid

PCR amplifikasie doeltreffendheid is nou verwant aan die werkverrigting van Taq ensiem.Nadat 'n goeie Taq-ensiemreaksiestelsel geoptimaliseer is, is die amplifikasiedoeltreffendheid bo 95%, en die amplifikasiereeks van die aanvanklike sjabloonhoeveelheid is wyd.Bevredigende amplifikasie kan verkry word wanneer die teikengeeninhoud laag is, en dit is nie maklik om vergiftig te word wanneer die templaathoeveelheid hoog is nie, en die eksponensiële amplifikasieperiode lank is.Vir die Taq-ensiem met swak werkverrigting, selfs al is die reaksiestelsel vir baie keer geoptimaliseer, is die amplifikasie-doeltreffendheid steeds minder as 90%, die "S"-vorm van die amplifikasie-kromme is nie duidelik nie, die helling is klein en die kurwe is plat.Wanneer die hoeveelheid sjabloon laag is, kan dit nie versterk word nie, en wanneer die hoeveelheid sjabloon hoog is, is die versterkingseffek nie ideaal nie.Daarom is die keuse van DNA-polimerases met hoë amplifikasie-doeltreffendheid van kardinale belang vir die sukses van PCR en qPCR.

2. Kies warmbegin Taq-ensiem met sterk ensiemkrag

Die ensiematiese krag van die Taq-ensiem hou verband met die amplifikasie-doeltreffendheid.Oor die algemeen, hoe sterker die ensiematiese krag van die warmstart-Taq-ensiem, hoe langer is die eksponensiële groeiperiode van PCR-versterking, hoe meer tipiese 'S-vormige' kurwe, hoe hoër is die fluoressensie-seinwaarde, en hoe meer geskik is vir multipleks PCR-opsporing.Handelsmerk-DNA-polimerases met swak ensiematiese krag kan oor die algemeen slegs 2-pleks reaksies ondersteun.Wanneer 3-pleks reaksies gedoen word, is die versterkingskromme laag, die fluoressensie seinwaarde is laag, en daar is geen tipiese versterkingskromme nie, so die resultate is moeilik om te beoordeel.

3. Kies 'n warmbegin-Taq-ensiem met hoë sensitiwiteit

Oor die algemeen het DNA-polimerase hoë amplifikasie-doeltreffendheid en hoë sensitiwiteit, maar daar is ook teenstrydighede.Indien die teikengeen oorvloed van die monster wat geamplifiseer moet word laag is, word dit aanbeveel om die amplifikasie sensitiwiteit van Taq ensiem te toets.Die mees algemene opsporingsmetode is om 10-voudige of 5-voudige gradiëntverdunning van die teikengeenplasmiedfragment uit te voer, PCR-opsporing by die laer verdunning uit te voer, en die warmbegin-Taq-ensiem met hoër opsporingsensitiwiteit te kies.

Uit bogenoemde kan gesien word dat navorsers moet kies volgens hul eie eksperimentele vereistes en befondsingsvoorwaardes.Dit is die beste om 'n gradiëntverdunning amplifikasie-eksperiment te doen om die amplifikasie-doeltreffendheid en sensitiwiteit van die warmbegin-Taq-ensiem op te spoor.

'n Voorbeeld van Foregene's Taq DNA Polimerase:

Foreasy HS Taq DNA Polimerase

Beskrywing

Foreasy HS Taq DNA Polimerase is 'n DNA-polimerase wat deur geen-rekombinasietegnologie in Escherichia coli-ingenieursbakterieë uitgedruk word.Die ensiem word gekombineer met 'n unieke reaksiebuffer, wat die produk hoogs bestand en versoenbaar maak, en kan die monsterlysaat (Foregene Lysis-stelsel) direk as 'n sjabloon vir opsporingsreaksies gebruik.

Toepassing

Kwalitatiewe PCR en kwantitatiewe PCR opsporing van gesuiwerde templates en nie-gesuiwerde templates.

Kwaliteitsbeheer

1.Geen eksogene nuklease-aktiwiteit bespeur nie

2.PCR metode om oorblywende genomiese DNA op te spoor sonder gasheer

3.Dit kan effektief enkelkopie-gene in die menslike genoom versterk

4.Stoor by kamertemperatuur vir 'n week, geen ooglopende aktiwiteitsveranderinge nie

Produkbesonderhede: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/