Laboratoriumtoetsing begin met monsterversameling, en monsterversameling is die maklikste om oor die hoof te sien.Die belangrikste ding vir monsterversameling is om die korrekte monstertipe te kies, toepaslike monsternemingsinstrumente te gebruik en redelike vervoer en verwerking uit te voer.

I.Sample tipe

Algemene voorbeeldtipes is soos volg:

Die steekproefmetode kan verwys na die tegniese spesifikasies vir omgewingsmonitering van die nuwe koronavirus in die landbouhandel (basaar) mark”:

1. Depper monsters van keeldeppers, hande, klere en ander voorwerpe van praktisyns: dit word vereis om die virusbewaringsoplossing in die virusmonsterbuis te gebruik en die monsterwatte deppers volledig te infiltreer.Die oppervlak van die grond) word herhaaldelik toegedien en meer as 3 keer gespoel.Terselfdertyd is dit nodig om meerpuntverspreide monsterneming op die oppervlak van die gemonsterde voorwerp uit te voer.

2. Voedseloppervlak-deppermonsters: Voedselmonsters kan nie direk versamel word nie.Die kos wat versamel moet word, moet versigtig geskei word en in 'n skoon monstersak gebêre word voordat deppermonsters versamel word.Dit word vereis om die virusbewaringsoplossing in die virusmonsterbuis te gebruik, nadat die monsterwatte depper volledig geweek is, om die oppervlak van die voedselmonster wat versamel moet word, meer as 3 keer herhaaldelik te smeer en uit te spoel.Terselfdertyd is dit nodig om meerpuntverspreide monsterneming op die monsteroppervlak uit te voer.

3. Rioolmonsters: Volgens die verspreiding van die dreineringstelsel in die mark, kies 2-3 rioolmonsterplekke, met die fokus op die interne pypnetwerkversameling, die stroomaf van die watervloeirigting, of die verbinding met die munisipale pypnetwerk.Om 'n deppermonster te versamel, dompel dit in die riool met 'n monsterwatte depper om dit die riool te laat adsorbeer en spoel dit meer as 3 keer in die monsterbuis.Om rioolmonsters te versamel, gebruik poliëtileen plastiekbottels om 30-500 ml rioolwatermonsters te versamel;vir rioolverwydering met 'n volume groter as 500 ml, kan poliëtileen plastiek emmers of spesiale verrykingstoerusting vir watermonsters op die perseel gebruik word.Terselfdertyd is dit nodig om meerpunt-verspreide monsterneming vir die rioolmonsterplek te doen.

4. Dieremonsters: Vir lewende diere kan steekproefdeppers gebruik word om liggaamsoppervlakdeppers, orofaryngeale deppers en anale deppers te versamel, en uitskeidings- of afskeidingsmonsters kan ook versamel en dienooreenkomstig op die rekordblad aangeteken word.Vir dieremonsters wat velafgetrek is, ens., gebruik watte deppers om hul liggaamsoppervlak en liggaamsholte deppermonsters te versamel.Dit is nodig om die virusbewaringsoplossing in die virusmonsterbuis te gebruik om die monsterwatte depper volledig te infiltreer, en dan die toediening van die oppervlak van die voedselmonster wat versamel moet word, te herhaal.Shabu meer as 3 keer.Terselfdertyd is dit nodig om meerpuntverspreide monsterneming op die monsteroppervlak uit te voer.

5. Ander toestelle: houers vir die vervoer en teel van diere soos hokke of vistenks.Neem eers waar of verstaan ​​die spesifieke soorte diere wat in die houer gestoor en geteel word, en versamel deppermonsters op die binnewand van die houer of vloeibare monsters van die inhoud.

6. Versamel aërosolmonsters in gebiede waar mense bymekaarkom, swak geventileerde plaaslike handelsareas, kantore en ruskamers.

II. Steekproefinstrumente
1. Bloedversamelingsbuis
As jy later nukleïensuurtoetsing en antikoagulantmonsters moet doen, word dit aanbeveel om 'n vakuumbloedvat wat EDTA-antikoagulant bevat te gebruik om bloed te versamel;vir serummonsters word dit aanbeveel om 'n vakuumbloedvat sonder antikoagulant te gebruik.

2. Monsterneming depper

Dit word aanbeveel om polipropileen deppers in plaas van kalsiumalginaat deppers of deppers met houtpale te gebruik, want dit kan stowwe bevat wat sekere virusse inaktiveer en PCR-toetsing inhibeer.Deppers met katoenkoppe kan nie gebruik word nie, want katoenvesels het 'n sterk adsorpsie van proteïen en word nie maklik in die daaropvolgende preserveeroplossing geëlueer nie.

In die “Tegniese Spesifikasies vir 10-in-1 Gemengde Versameling en Opsporing van Nuwe Coronavirus-nukleïensure” word dit duidelik bepaal dat “die steekproef depper gemaak moet word van poliëster, nylon en ander nie-katoen- en nie-kalsiumalginaat-materiale, en die handvatsel moet van nie-houtmateriaal gemaak word.Die breekpunt is ongeveer 3 cm vanaf die bokant van die depperkop, wat maklik is om te breek.”

Die CDC in die Verenigde State het ook genoem "Gebruik slegs sintetiese vesel deppers met plastiek- of draadskagte.Moenie kalsiumalginaatdeppers of deppers met houtskagte gebruik nie,aangesien hulle stowwe kan bevat wat sommige virusse inaktiveer en PCR-toetsing inhibeer.

Tans wyd gebruik word, is 'n weggooibare steriele nylon-vlokkende depper gekombineer met 'n plastiekstaaf.Die stroomdepper het beter waterabsorpsie en vrystellingstempo.Volgens verskillende monsternemingsplekke het die depperkop ook verskillende groottes en vesels.Die dikte.”

3. Monster vervoer bewaring oplossing

Virus inaktivering preservering oplossing: 'n gepaste hoeveelheid guanidien sout konsentrasie en 'n verskeidenheid van virus lisis komponente kan die virus direk liseer om nukleïensuur vry te stel, RNase en DNase inaktiveer, en verseker die integriteit van nukleïensuur, wat gebruik kan word vir daaropvolgende qPCR opsporing.Dit kan nie vir virusverbouing en isolasie gebruik word nie.

Virusvervoer- en preserveringsoplossing: bevat soute, aminosure, vitamiene, glukose en proteïene wat nodig is vir die oorlewing van die virus, wat die aktiwiteit van die virus kan handhaaf.Dit kan gebruik word vir die nukleïensuuronttrekking en opsporing van die virus in die toekoms, en dit kan ook gebruik word vir die kweek en skeiding van die virus.

4. Monsterbewaringsbuis en monstersak

Die monsteropbergbuis moet 'n steriele plastiekbuis wees met 'n skroefdop wat nie nukleïensuur adsorbeer nie.Elke monsterbuis moet met 'n monstersak bedek word om lekkasie en kontaminasie van die monster te voorkom.

III.Stoorstowwe in die monster

Interfererende stowwe in PCR-eksperimente

1. endogene interferent

Stowwe wat in die liggaamsmonster voorkom, kan inmeng met die opsporing van ander stowwe.

Bloed:heem (>1mg/ml), hemien (>0.1ng/μl), trigliseriede, IgG, ens.;

Urine:Ureum (20mM);

Stoel:plant polisakkariede, cholate;

Sneesdoekie:protease, kollageen;

Melk: protease, kalsiumioon;

Dwelms: antibiotika, antivirale middels, hormone, ens.

ander.

2. eksogene interferent

Dit kom van stowwe wat kan inmeng met die opsporing van ander stowwe in vitro.Monsterbymiddels en stowwe wat tydens monsterinsameling en verwerking gekontak kan word:

Toets voorrade: serumskeidingsgel, monsterversamelhouer en rubberprop, kateter, kateterspoelvloeistof, handskoenpoeier, ens.

Antistolmiddel: heparien (>0.1 U/mL), EDTA (>0.5 mM), ens.;

Organiese oplosmiddels: isopropanol (>0,1 IE/ml), betaïen, dimetielsulfoksied, formamied, gliserien, PEG, ens.;

Ontsmettingsmiddels: alkohole (etanol>1%), aldehiede, fenole (fenol>0,2%), peroksiede, sterk sure (HCL), sterk alkalieë (NaOH), ens.;

Skoonmaakmiddel:SDS (>0,005%);

Grond: Humus

Kleurstof: Indigo

ander.

Onder werklike buitenshuise monsterneming toestande, soos die versameling van omgewingsmonsters, kan die monsters 'n verskeidenheid van interfererende stowwe bevat, en die samestelling van interfererende stowwe in elke plek is anders, wat vereis dat PCR interferensie eksperimente uitgevoer moet word volgens plaaslike toestande.

IV.Monster berging en vervoer toestande

Vars versamelde kliniese monsters moet binne 2 tot 4 uur na versameling by 2°C tot 8°C na die laboratorium gestuur word.Berg by 4℃ binne 24 uur.Monsters wat vir virusisolasie en nukleïensuuropsporing gebruik word, moet so gou as moontlik getoets word.Monsters wat binne 24 uur getoets kan word, kan by 4°C gestoor word;monsters wat nie binne 24 uur opgespoor kan word nie, moet by -70°C of laer gestoor word (indien nie- Berg by 70°C in 'n yskas by -20°C).

Opsomming:Die gestandaardiseerde versameling, vervoer en berging van monsters is noodsaaklik vir daaropvolgende toetsing.Die vals negatiewe van baie laboratoriumtoetse word veroorsaak deur onbehoorlike versameling, vervoer en berging van monsters wat lei tot die afbraak van virale nukleïensuur.Baie laboratoriums ignoreer egter steeds die belangrikheid van monsterneming.Ek hoop hierdie artikel kan almal se aandag op steekproefneming wek en meer wetenskaplike en redelike steekproefneming maak!

Verwante produk:

SARS-CoV-2 Variant Nukleïensuur Opsporing Kit (I) (Multiplex PCR Fluorescent Probe Metode) - Vir Opsporing van Mutante van Brasilië, Suid-Afrika en die Verenigde Koninkryk