Bloed-RNA-isolasiestel
Kit beskrywing:
Kat.nr.RE-04011/04013
Vir totale RNA-suiwering uit volbloed 104 ≤ Witbloedselle ≤ 107
Isoleer en suiwer bloed-RNA vinnig uit witbloedselle.
- Jy hoef nie bekommerd te wees oor RNA-afbraak nie.Die hele stel is RNase-vry
-Eenvoudig—alle bewerkings word by kamertemperatuur voltooi
- Vinnig—operasie kan binne 20 minute voltooi word
-Hoë RNA-opbrengs: slegs RNA-kolom en unieke formule kan RNA doeltreffend suiwer
-Veilig—geen organiese reagens gebruik nie
-Groot monsterverwerkingskapasiteit—tot 200μl monsters kan elke keer verwerk word.
-Hoë kwaliteit - die gesuiwerde RNA is hoogs suiwer, vry van proteïene en ander onsuiwerhede, en kan aan verskeie stroomaf eksperimentele toepassings voldoen.
Beskrywings
Die stel neem die draaikolom en formule aan wat deur ons maatskappy ontwikkel is, wat 'n hoë-suiwerheid en hoë gehalte totale RNA doeltreffend uit antikoaguleerde volbloed kan onttrek.Die stel verskaf rooibloedsel-lisaat (Buffer RCL), wat rooibloedselle vinnig en doeltreffend kan liseer en witbloedselle kan behou.Die doeltreffende DNA-skoonmaakkolom kan die supernatant en sellisete maklik skei en genomiese DNA adsorbeer en verwyder.Die operasie is eenvoudig en tydbesparend;Die RNA-alleen-kolom kan RNA doeltreffend bind, en met 'n unieke formule kan dit 'n groot aantal monsters op dieselfde tyd verwerk.
Die hele stelsel RNase-Free maak die onttrekte RNA onafbreekbaar;Buffer RW1 en Buffer RW2 buffer wasstelsel maak die verkry RNA vry van proteïen, DNA, ione en organiese verbinding besoedeling.
Kit Inhoud
| Bloed Totale RNA Isolasie Kit | ||
| Kit samestelling | RE-04011 | RE-04013 |
| 50 keer | 200 keer | |
| Buffer RCL (10×) | 52,5 ml | 210 ml |
| Buffer BRL1* | 30 ml | 120 ml |
| Buffer BRL2 | 18 ml | 66ml |
| Buffer RW1* | 25 ml | 100 ml |
| Buffer RW2 | 24 ml | 96ml |
| RNase-vry ddH2 O | 10 ml | 40 ml |
| Slegs RNA-kolom | 50 stelle | 200 stelle |
| DNS-skoonmaakkolom | 50 stelle | 200 stelle |
| handleiding | 1 kopie | 1 kopie |
Kenmerke en voordele
- Jy hoef nie bekommerd te wees oor RNA-afbraak nie.Die hele stel is RNase-vry.
-Eenvoudig—alle bewerkings word by kamertemperatuur voltooi.
- Vinnig—operasie kan binne 20 minute voltooi word.
-Hoë RNA-opbrengs: slegs RNA-kolom en unieke formule kan RNA doeltreffend suiwer.
-Veilig—geen organiese reagens gebruik nie.
-Groot monsterverwerkingskapasiteit—tot 200μl monsters kan elke keer verwerk word.
-Hoë kwaliteit - die gesuiwerde RNA is hoogs suiwer, vry van proteïene en ander onsuiwerhede, en kan aan verskeie stroomaf eksperimentele toepassings voldoen.
Stel parameters
Kit aansoek:
Dit is geskik vir die ekstraksie en suiwering van totale RNA uit soogdier volbloed.
Werk vloei
Bergingstoestande
Buffer RCL (10×) moet by 2-8 ℃ gestoor word;ander komponente van die kit kan by kamertemperatuur (15-25 ℃) onder droë toestande gestoor word, en kan vir 12 maande gestoor word.Buffer BRL1 kan vir 1 maand by 4 ℃ gestoor word nadat β-merkapto-etanol bygevoeg is (opsioneel).
Let wel: As dit by lae temperatuur gestoor word, is die oplossing geneig tot neerslag.Maak seker dat jy die oplossing in die kit by kamertemperatuur plaas vir 'n tydperk voor gebruik.Indien nodig, voorverhit dit in 'n 37° C waterbad vir 10 minute om die neerslag op te los, en meng goed voor gebruik.
Gidse vir probleemontleding
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Geen RNA kan onttrek word nie of die opbrengs van nukleïensuur is laag
Daar is gewoonlik baie faktore wat herwinningsdoeltreffendheid beïnvloed, soos: monster RNA-inhoud, metode van werking, elueringsvolume, ens.。
Ontleding van algemene oorsake:
1.Ysbad of lae-temperatuur (4 ° C) sentrifugering tydens werking.
Voorstel: kamertemperatuur (15-25 ° C) werking, nooit ysbad en lae temperatuur sentrifugeer nie.
2. Onbehoorlike monsterberging of monsterberging vir te lank.
Voorstel: Berg monsters by -80 ° C of vries in vloeibare stikstof, en vermy herhaalde vries-ontdooi gebruik;probeer om vars versamelde monsters vir RNA-ekstraksie te gebruik.
3.Onvoldoende monster lisis
Aanbeveling: Maak asseblief seker dat die monster en die werkoplossing (lineêre akrilamied) deeglik gemeng en vir 10 minute by kamertemperatuur (15-25 ° C) geïnkubeer is.
4.Die eluent is verkeerd bygevoeg
Aanbeveling: Maak seker dat RNase-vrye ddH2O by die middel van die membraan van die suiweringskolom gevoeg word
5. Onbehoorlike volume watervrye etanol in Buffer viRW2
Voorstel: Volg asseblief die instruksies, voeg die korrekte volume watervrye etanol by Buffer viRW2 en meng dit goed voordat die kit gebruik word.
6. Onbehoorlike monstergebruik.
Voorstel: 200 µl monster per 500 µl buffer virl.Oormatige monstervolume sal lei tot verminderde RNA-ekstraksietempo.
7. Onbehoorlike elueringsvolume of onvolledige eluering.
Voorstel: Die eluentvolume van die suiweringskolom is 30-50μl;indien die elueringseffek nie bevredigend is nie, word dit aanbeveel om voorafverhitte RNase-vrye ddH by te voeg2O en verleng die tyd plaas by kamertemperatuur, soos 5-10min
8.Suiweringkolom het etanolresidu nadat dit in Buffer viRW2 gespoel is.
Voorstel: Indien etanol nog oorbly na spoel in Buffer viRW2 en leë buis sentrifugering vir 2min, kan die suiweringskolom by kamertemperatuur gelaat word vir 5min na leë buis sentrifugering om oorblywende etanol ten volle te verwyder.
Die afbreek van gesuiwerde RNA-molekules
Die kwaliteit van die gesuiwerde RNA hou verband met faktore soos monsterberging, RNase-kontaminasie en werking.
Ontleding van algemene oorsake:
1. Die versamelde monsters is nie betyds gestoor nie.
Voorstel: As die monster nie betyds na versameling gebruik word nie, stoor dit asseblief by -80 ℃ of vloeibare stikstof onmiddellik.Vir die onttrekking van RNA-molekules, probeer om waar moontlik vars versamelde monsters te gebruik.
2. Versamelde monsters was herhaaldelik gevries en ontdooi.
Voorstel: Vermy herhaalde vries en ontdooiing (nie meer as een keer nie) tydens monsterinsameling en berging, anders sal die opbrengs van nukleïensuur afneem.
3.RNase is in die operasiekamer ingebring of geen weggooibare handskoene, maskers, ens. is gedra nie.
Voorstel: Die ekstraksie van RNA-molekules-eksperiment word die beste in 'n aparte RNA-operasiekamer uitgevoer, en die eksperimentele tafel word voor die eksperiment skoongemaak.Dra weggooibare handskoene en maskers tydens die eksperiment om RNA-afbraak wat veroorsaak word deur RNase bekendstelling te vermy.
4.Die reagens word tydens die gebruik deur RNase besmet.
Voorstel: Vervang met 'n nuwe virale RNA-isolasiestel vir verwante eksperimente.
5.Die RNase-kontaminasie van die sentrifugeerbuise, pipetpunte, ens. Voorstel: Maak seker dat die sentrifugeerbuise, pipetpunte en pipette almal RNase-vry is.
Die gesuiwerde RNA-molekules het stroomaf-eksperimente beïnvloed
Die RNA-molekules wat deur die suiweringskolom gesuiwer word, sal stroomaf-eksperimente beïnvloed as daar te veel soutione of proteïene is, soos: omgekeerde transkripsie, Northern Blot, ens.。
1.Daar is oorblywende souione in die geëlueerde RNA-molekules.
Aanbeveling: Maak seker dat die korrekte volume watervrye etanol by Buffer viRW2 gevoeg is, en was die suiweringskolom twee keer volgens die korrekte sentrifugeringspoed op die gebruiksinstruksies; As daar nog sousione oor is, kan jy Buffer viRW2 by die suiweringskolom voeg, en dit vir 5min by kamertemperatuur laat.Doen dan sentrifugering om sousione-kontaminasie tot die grootste mate te verwyder
2.Daar is oorblywende etanol in die geëlueerde RNA-molekules
Voorstel: sodra jy bevestig dat suiweringskolomme deur Buffer viRW2 gespoel is, voer leë-buis sentrifugering uit volgens die sentrifugale spoed op die gebruiksinstruksies.As daar nog etanol oor is, kan dit vir 5 minute by kamertemperatuur gelaat word na 'n leë buis sentrifugering om die oorblywende etanol tot die grootste mate te verwyder.
Instruksiehandleidings:
Virale RNA Isolasie Kit Instruksiehandleiding
