hou by die kontrak”, voldoen aan die markvereiste, sluit aan by die markmededinging deur sy goeie gehalte, en bied ook meer omvattende en uitstekende ondersteuning aan kliënte om hulle 'n groot wenner te laat word.Die strewe van die maatskappy is beslis die plesier van die kliënte vir China Nuwe produk wat die beste verkoop is vir virale DNA & RNA-ekstraksiestel, ons het ons besigheid uitgebrei na Duitsland, Turkye, Kanada, die VSA, Indonesië, Indië, Nigerië, Brasilië en 'n paar ander streke van die wêreld.Ons werk hard om een ​​van die beste globale verskaffers te wees.
hou by die kontrak”, voldoen aan die markvereiste, sluit aan by die markmededinging deur sy goeie gehalte, en bied ook meer omvattende en uitstekende ondersteuning aan kliënte om hulle 'n groot wenner te laat word.Die strewe van die maatskappy, is beslis die kliënte se plesier virChina Rna & DNA-ekstraksiestel en nukleïensuurekstraksie, Ons sien daarna uit om 'n wedersyds voordelige verhouding met u te vestig op grond van ons produkte en oplossings van hoë gehalte, billike pryse en beste diens.Ons hoop dat ons produkte vir jou 'n aangename ervaring sal bring en 'n gevoel van skoonheid sal dra.
Instruksiehandleidings:Plant Total RNA Isolation Kit Plus Instruksiehandleiding

hou by die kontrak”, voldoen aan die markvereiste, sluit aan by die markmededinging deur sy goeie gehalte, en bied ook meer omvattende en uitstekende ondersteuning aan kliënte om hulle 'n groot wenner te laat word.Die strewe van die maatskappy is beslis die plesier van die kliënte vir China Nuwe produk wat die beste verkoop is vir virale DNA & RNA-ekstraksiestel, ons het ons besigheid uitgebrei na Duitsland, Turkye, Kanada, die VSA, Indonesië, Indië, Nigerië, Brasilië en 'n paar ander streke van die wêreld.Ons werk hard om een ​​van die beste globale verskaffers te wees.
China Nuwe produk China Rna&DNA-ekstraksiestel en nukleïensuurekstraksie, ons sien daarna uit om 'n wedersyds voordelige verhouding met u te vestig op grond van ons hoëgehalte produkte en oplossings, billike pryse en beste diens.Ons hoop dat ons produkte vir jou 'n aangename ervaring sal bring en 'n gevoel van skoonheid sal dra.

Die kolom geprop

Nadat die kolom geprop is, is die RNA-opbrengs verminder of selfs onmoontlik om die RNA te suiwer, en die verkryde RNA-massa is laag.

Algemene oorsaak-analise:

1. Monsterpouses is nie deeglik nie.

Monsterbreuk veroorsaak nie heeltemal dat DNS-REINIGINGSKOLOM geblokkeer word nie, terwyl dit RNA-opbrengs en kwaliteit beïnvloed.Ons beveel vinnige maal operasie in 'n voldoende vloeibare stikstof wanneer jy die monsters gebreek, Probeer om die monster selwand, selmembraan en ander weefsel te vergruis.Vir plantmonsters van poliolpolisakkariede, beveel ons aan dat jy Plant Total RNA ISOLASIEKIT PLUS gebruik.

2. Wanneer die geskeide monster supernatant met DNA-skoonmaakkolom opgesuig word, kan die moontlike sel gefragmenteerde neerslag ingeasem word.

Die sel-gefragmenteerde sedimente wat geneem word, sal die SLEGS-RNA-kolom veroorsaak wat geblokkeer sal word wanneer die RNA-adsorpsie-bewerking uitgevoer word (sien stap 6).Ons beveel aan dat u hierdie supernatant versigtig suig om te verhoed dat selafval gesuig word.

3. Monster aanvanklike hoeveelheid is te veel.

Oormatige monstergebruik sal lei tot onvolledige monsterfragmentasie of onvolledige sellise deur Buffer PSL1, wat lei tot blokkasie van die suiweringskolom tydens suiwering.Plant Total RNA Isolation Kit Elke enkele gesuiwerde bedryfsmonster is 50 mg.Vir plantmonsters van poliolpolisakkariede, beveel ons aan dat jy Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS probeer.

4. Die temperatuur van die sentrifuge is te laag.

Die hele RNA-isolasie- en suiweringsproses word by kamertemperatuur (20-25°C), behalwe dat die monsterweefsel deur vloeibare stikstof gebreek word. Die temperatuur van sommige kryogeniese sentrifuges is laer as 20℃, wat blokkasie van DNA-skoonmaakkolom en/of RNA-alleenkolom kan veroorsaak.As dit gebeur, stel die sentrifuge temperatuur op 20-25℃, enmaak seker dat die lysismengsel en/of die etanol-toegevoegde supernatant voorverhit is tot 37°C.

Geen RNA onttrek of RNA-opbrengs is laag nie

Daar is gewoonlik baie faktore wat die herwinningsdoeltreffendheid beïnvloed, soos: monster RNA-inhoud, werkingsmetode, die elueringsvolume, ens.

Ontleding van algemene oorsake soos hieronder:

1. 'n Ysbad of lae temperatuur (4°C) sentrifugering is tydens die operasie uitgevoer.

Voorstel: Werk by kamertemperatuur (15-25°C) in die hele proses, moenie ysbad en lae temperatuur sentrifugering doen nie.

2.Die RNA is afgebreek as gevolg van onbehoorlike bewaring van die monster of langtermynbewaring van die monster.

Aanbeveling: Vars versamelde monsters moet vinnig in vloeibare stikstof gevries word, en dan vir 'n lang tyd by -80°C gestoor word, vermy herhaalde vries en ontdooiing van monsters;of week die monsters dadelik in RNA stabilisator RNAlater oplossing (diermonsters).

3. Onvoldoende monsterfragmentasie en lisis lei tot blokkasie van die suiweringskolom.

Voorstel: Wanneer die weefsel gemaal word, maak asseblief seker dat die weefsel voldoende gemaal is, en dra dit vinnig oor na die voorafbereide Buffer PSL1 (bevestig dat die korrekte proporsie β-ME bygevoeg is, sien stap 1 van die prosedure).

4.Die eluent is verkeerd bygevoeg.

Voorstel: Maak seker dat RNase-Free ddH2O in die middel van die suiweringskolommembraan gedrup word.

5.Die korrekte volume absolute etanol is nie by Buffer PSL2 of Buffer PRW2 gevoeg nie.

Voorstel: Volg asseblief die instruksies, voeg die korrekte volume absolute etanol by Buffer PSL2 en Buffer PRW2 en meng goed voor die stel gebruik word.

6. Die hoeveelheid weefselmonster is onvanpas.

Voorstel: Gebruik 50 mg weefsel per 500 μl Buffer PSL1.Die gebruik van te veel weefsel sal die hoeveelheid RNA wat onttrek word verminder en die suiwerheid van die resulterende RNA sal ook verminder word.Ons beveel sterk aan dat die aanvanklike monsterdosis nie 50 mg per RNA-ekstraksie-operasie moet oorskry nie.

7.Onvanpaste elutievolume of onvolledige eluering.

Voorstel: Die eluentvolume van die suiweringskolom is 50-200 μl;indien die elueringseffek nie bevredigend is nie, word dit aanbeveel om die tyd by kamertemperatuur te verleng nadat voorverhitte RNase-vrye ddH2O bygevoeg is, soos 5-10min.

8. Die suiweringskolom het etanolresidu nadat dit met BufferPRW2 gewas is.

Voorstel: As die leë buis vir 1 min sentrifugeer word en daar is nog etanol oor na was in Buffer PRW2, kan jy die tyd van die leë buis sentrifugering na 2 min verhoog, of die suiweringskolom vir 5 min by kamertemperatuur plaas om die oorblywende etanol heeltemal te verwyder.

9.Die stel is verkeerd gebruik.

Voorstel: Vir plantmonsters van polifenoliese polisakkariede kan die gebruik van algemene stelle soos Plant Total RNA Isolation Kit dalk nie ideale RNA monsters verkry nie.Ons beveel aan dat jy Plant Total RNA IsolationKit Plus gebruik, wat spesiaal ontwerp is vir polifenoliese polisakkariedplantmonsters.’n Stel spesiaal ontwikkel vir die onttrekking van RNA uit polifenol- en polisakkariedplantmonsters.

OD260/OD280 waarde is laag

RNA-elutie met ddH2O en gebruik vir spektrofotometerlesings lei tot lae OD260/OD280 waardes.Ons beveel aan om 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (eerder as RNase-vry ddH2O om RNA te elueer) te gebruik om relatief korrekte OD260/OD280-waardes te verkry, sien "RNA-konsentrasie- en suiweringstoetse" op bladsy 19.

Die gesuiwerde RNA word afgebreek

Die kwaliteit van gesuiwerde RNA hou verband met faktore soos monsterpreservering, RNase-kontaminasie en manipulasie.

Ontleding van algemene oorsake:

1. Weefselmonsters is nie betyds na versameling gestoor nie.

Aanbeveling: Indien die weefselmonsters nie betyds na versameling gebruik word nie, stoor dit asseblief onmiddellik in vloeibare stikstof by lae temperatuur of dra dit oor na -80°C vir langtermynberging na vinnige vriesing in vloeibare stikstof, of dompel die monsters dadelik in RNA stabiliseerder RNAlater oplossing (diermonsters).Vir RNA-ekstraksie, probeer om vars versamelde weefselmonsters te gebruik.

2. Herhaalde bevriesing en ontdooiing van weefselmonsters.

Voorstel: Wanneer weefselmonsters gestoor word, is dit die beste om dit in klein stukkies te sny vir preservering, en 'n deel daarvan uit te haal wanneer dit gebruik word om die afbraak van RNA wat veroorsaak word deur herhaalde vries en ontdooiing van die monsters te vermy.

3.RNase word in die operasiekamer ingebring of weggooibare handskoene, maskers, ens.

Voorstel: RNA-ekstraksie-eksperimente word die beste uitgevoer in afsonderlike RNA-operasies, en die laboratoriumtafel moet voor die eksperiment skoongemaak word, en weggooibare handskoene en maskers moet tydens die eksperiment gedra word om RNA-afbraak wat veroorsaak word deur die bekendstelling van RNase tot die grootste mate te vermy.

4.Die reagens is tydens gebruik deur RNase besmet.

Voorstel: Vervang met 'n nuwe reeks plant totale RNA ekstraksiestelle vir verwante eksperimente.

5. Die sentrifugebuisies en pipetpunte wat vir RNA-manipulasie gebruik word, is met RNase besmet.

Voorstel: Maak seker dat die sentrifugeerbuise, pipetpunte, pipette, ens. wat in RNA-ekstraksie gebruik word, almal RNase-vry is.

Instruksiehandleidings:

Plant Total RNA Isolation Kit Plus Instruksiehandleiding