• facebook
  • gekoppel
  • youtube
English
bladsy_banier

Foreasy HS Taq DNA Polimerase

Foreasy HS Taq DNA Polimerase Uitstalbeeld
  • Foreasy HS Taq DNA Polimerase

Kit beskrywing:

◮Hoë spesifisiteit: Die ensiem met hoë warmbeginaktiwiteit.

◮Vinnige versterking: 10 sek/kb.

◮Hoë sjabloonaanpasbaarheid: kan gebruik word om High doeltreffend te versterkGCwaardeenverskeie moeilik-om te versterk DNA-sjablone.

◮Sterk getrouheid: Die getrouheid is 6 keerof gewone Taq Ensiem.

voorgenome krag


Produkbesonderhede

Produk Tags

Gereelde vrae

Beskrywing

Foreasy HS Taq DNA Polimerase is 'n nuwe Taq ensiem wat in Escherichia coli ingenieursbakterieë uitgedruk word deur geen rekombinasie tegnologie.Nadat die ensiem met 'n spesiale proses behandel is, is dit's aktiwiteit word geïnhibeer voor termiese aktivering, waardeur die nie-spesifieke amplifikasie wat veroorsaak word deur die nie-spesifieke uitgloeiing van primers of primer dimers onder lae temperatuur toestande inhibeer.Hierdie produk is geskik vir hoogs spesifieke PCR Reactioon, M ultiple x PCR , hoë GC-inhoud (> 60%) ,metsekondêre struktuurof andersterk agtergrondgenoomicsamplifikasie en grootskaalse genomicsamplifikasie opsporing.Die ensiem het 5' → 3' DNA-polimerase-aktiwiteit en 5' → 3'-eksonuklease-aktiwiteit, maar geen 3' → 5'-eksonuklease-aktiwiteit nie.

Kit komponente

Komponent IM-01021 IM-01022 IM-01023
Foreasy HS Taq DNA Polimerase (5 U/μL)  5 000 U (1 ml)  50 KU (10 ml)  500 KU (100 ml)
2× Taq-reaksiebuffer  25 ml × 5  250 ml × 5  500 ml × 25

Kenmerke en voordele

- Hoë spesifisiteit: Die ensiem met hoë warmbeginaktiwiteit.

- Vinnige versterking: 10 sek/kb.

- Hoë sjabloonaanpasbaarheid: kan gebruik word om High doeltreffend te versterkGCwaardeenverskeie moeilik-om te versterk DNA-sjablone.

- Sterk getrouheid: Die getrouheid is 6 keerof gewone Taq Ensiem.

Kit aansoek

- Verskeie PCR/qPCR-stelsel en direkte PCR-stelsel

- PCR Amplified DNA Fragment

- DNA-merk

- DNA-volgordebepaling

- PCR plus A stert

Aktiwiteit Definisie

1U : Die hoeveelheid ensiem wat benodig word om 10 nmol vanDNAin suur-onoplosbare materiaal deur gebruik te maak van geaktiveerde salmsperm DNA as sjabloon / onderlaag, 74 °C, 30 minute.

Reaksie toestand

Temperatuur Reaksie Tyd Fietsry tyd
37°C 5 min 1
94°C 5 min 1
94°C 10 sek  40
60°C 10 sek

Let wel:Vir 10 µL- en 20 µL-stelsels, voeg 'n gelyke volume minerale olie by as die termiese fietsryer nie 'n hittedeksel het nie.

PCR-reaksietoestande wissel na gelang van die strukturele toestande van sjablone, primers, en dies meer.In die spesifieke operasie is dit nodig om die optimale reaksietoestande, insluitend uitgloeiingstemperatuur, verlengingstyd, ens., te ontwerp volgens die spesifieke toestande soos die sjabloontipe, die grootte van die teikenfragment, die basisvolgorde van die geamplifiseerde fragment, en die GC-inhoud en lengte van die primer.

Berging

-20 ± 5 °C vir 2 jaar of by -80 °C vir langtermynberging.

  • Vorige:
  • Volgende:

    • Geen versterkingseine nie

    1.Die Taq DNA Polimerase in die stel verloor sy aktiwiteit as gevolg van onbehoorlike berging of verstryking van die kit.
    Aanbeveling: Bevestig die bergingstoestande van die kit;voeg weer 'n toepaslike hoeveelheid Taq DNA Polimerase by die PCR-stelsel of koop 'n nuwe Real Time PCR Kit vir verwante eksperimente.

    2.Daar is baie inhibeerders van Taq DNA Polimerase in die DNA-sjabloon.
    Voorstel: Hersuiwer die sjabloon of verminder die hoeveelheid sjabloon wat gebruik word.

    3. Die Mg2+ konsentrasie is nie geskik nie.
    Aanbeveling: Die Mg2+ konsentrasie van die 2× Real PCR Mix wat ons verskaf, is 3.5mM.Vir sommige spesiale primers en templates kan die Mg2+ konsentrasie egter hoër wees.Daarom kan jy MgCl2 direk byvoeg om die Mg2+ konsentrasie te optimaliseer.Dit word aanbeveel om die Mg2+ 0.5mM elke keer te verhoog vir optimalisering.

    4. Die PCR amplifikasie toestande is nie geskik nie, en die primer volgorde of konsentrasie is onbehoorlik.
    Voorstel: bevestig die korrektheid van die primervolgorde en die primer is nie afgebreek nie;as die versterkingsein nie goed is nie, probeer om die uitgloeitemperatuur te verlaag en pas die primerkonsentrasie gepas aan.

    5.Die hoeveelheid sjabloon is te min of te veel.
    Aanbeveling: Doen sjabloon linearisering gradiënt verdunning, en kies die sjabloon konsentrasie met die beste PCR effek vir Real Time PCR eksperiment.

    NTC het te hoë fluoressensiewaarde

    1.Reagensbesoedeling veroorsaak tydens operasie.
    Aanbeveling: Vervang met nuwe reagense vir Real Time PCR eksperimente.

    2. Kontaminasie het plaasgevind tydens die voorbereiding van die PCR-reaksiesisteem.
    Aanbeveling: Tref die nodige beskermende maatreëls tydens operasie, soos: die dra van latexhandskoene, die gebruik van 'n pipetpunt met 'n filter, ens.

    3.Die primers word afgebreek, en die degradasie van die primers sal nie-spesifieke amplifikasie veroorsaak.
    Voorstel: Gebruik SDS-PAGE elektroforese om vas te stel of die primers afgebreek is, en vervang dit met nuwe primers vir Real Time PCR eksperimente.

    Primer dimeer of nie-spesifieke amplifikasie

    1. Die Mg2+ konsentrasie is nie geskik nie.
    Aanbeveling: Die Mg2+ konsentrasie van die 2× Real PCR EasyTM Mix wat ons verskaf, is 3,5 mM.Vir sommige spesiale primers en templates kan die Mg2+ konsentrasie egter hoër wees.Daarom kan jy MgCl2 direk byvoeg om die Mg2+ konsentrasie te optimaliseer.Dit word aanbeveel om die Mg2+ 0.5mM elke keer te verhoog vir optimalisering.

    2.Die PCR-gloeitemperatuur is te laag.
    Voorstel: Verhoog die PCR-gloeitemperatuur elke keer met 1 ℃ of 2 ℃.

    3.Die PCR-produk is te lank.
    Aanbeveling: Die lengte van die Real Time PCR-produk moet tussen 100-150bp wees, nie meer as 500bp nie.

    4.Die primers word afgebreek, en die degradasie van die primers sal lei tot die voorkoms van spesifieke amplifikasie.
    Voorstel: Gebruik SDS-PAGE elektroforese om vas te stel of die primers afgebreek is, en vervang dit met nuwe primers vir Real Time PCR eksperimente.

    5. Die PCR-stelsel is onbehoorlik, of die stelsel is te klein.
    Voorstel: Die PCR-reaksiestelsel is te klein, sal veroorsaak dat die opsporing akkuraatheid afneem.Dit is die beste om die reaksiestelsel wat deur die kwantitatiewe PCR-instrument aanbeveel word te gebruik om die Real Time PCR-eksperiment weer uit te voer.

    Swak herhaalbaarheid van kwantitatiewe waardes

    1. Die instrument funksioneer nie.
    Voorstel: Daar kan foute tussen elke PCR-gat van die instrument wees, wat lei tot swak reproduseerbaarheid tydens temperatuurbestuur of opsporing.Kontroleer asseblief volgens die instruksies van die ooreenstemmende instrument.

    2.Die monstersuiwerheid is nie goed nie.
    Aanbeveling: Onsuiwer monsters sal lei tot swak reproduceerbaarheid van die eksperiment, wat die suiwerheid van die sjabloon en primers insluit.Dit is die beste om die sjabloon te hersuiwer, en die primers word die beste gesuiwer deur SDS-PAGE.

    3. Die PKR-stelsel voorbereiding en berging tyd is te lank.
    Voorstel: Gebruik die Real Time PCR-stelsel vir PCR-eksperiment onmiddellik na voorbereiding, en moet dit nie te lank eenkant laat nie.

    4. Die PCR amplifikasie toestande is nie geskik nie, en die primer volgorde of konsentrasie is onbehoorlik.
    Voorstel: bevestig die korrektheid van die primervolgorde en die primer is nie afgebreek nie;as die versterkingsein nie goed is nie, probeer om die uitgloeitemperatuur te verlaag en pas die primerkonsentrasie gepas aan.

    5. Die PCR-stelsel is onbehoorlik, of die stelsel is te klein.
    Voorstel: Die PCR-reaksiestelsel is te klein, sal veroorsaak dat die opsporing akkuraatheid afneem.Dit is die beste om die reaksiestelsel wat deur die kwantitatiewe PCR-instrument aanbeveel word te gebruik om die Real Time PCR-eksperiment weer uit te voer.

    Skryf jou boodskap hier en stuur dit vir ons

    VerwanteProdukte

    Druk enter om te soek of ESC om toe te maak