Direkte RT-qPCR Kit
Kit beskrywing:
◮ Direkte RT-qPCR Kit, met behulp van Foreasy Reverse Transcriptase en Foreasy HS Taq DNA Polimerase ontwikkel deur Foregene, met unieke reaksie buffer, maak hierdie kit met sterk weerstand en verenigbaarheid, en dit kan reaksie direk toets deur Foregene Lysis stelsel as sjabloon te gebruik.Hierdie stel kan aansoek doen vir COVID-19-nukleïensuur-opsporingstel en ander patogeniese bakterieë-nukleïensuur-opsporingstel.
Beskrywing
Direct RT-qPCR Kit verskaf afsonderlik verpakte RT-qPCR buffer en hoë doeltreffende ensiemmengsel (Taq、M-MLV、RI), wat dit gerieflik maak vir die skep van back-end kits en stelselaanpassing, binne eenvoudige verifikasie.
Spesifikasies
500T, 50,000T
Kit komponente
| Kit inhoud (20 μL reaksiestelsel) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50 000 T | |
| Direkte Ensiemmengsel | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
| 2× Direkte RT-qPCR-buffer | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Instruksie | 1 | 1 |
Bedryfstappe
Voor reagensvoorbereiding moet al die reagense in die stel by kamertemperatuur ontdooi word en liggies gemeng word.
A: Berei voor of sjabloon en reagens
1. Berei voorbereide RNA sjabloon (Dit word aanbeveel om Foregene Total RNA Isolation Kit reeks kit te gebruik om RNA sjabloon te onttrek en te suiwer) of monster kraak produk (Dit word aanbeveel om Foregene Lysis stelsel te gebruik), spesifieke primers (10 μM) en ander relevante verbruiksgoedere, instrument.
2. Plaas die 2× Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O en 20× ROX Reference Dye (as dit's nodig) in die boks met ys, wat dit natuurlik laat smelt en saggies gemeng word.
B: Berei voor of RT-qPCR stelsel
Tafel 1 : Berei voor of RT-qPCR sstelsel
| Komponent | Volume | Finale konsentrasie |
| 2× Direkte RT-qPCR-buffer | 10 μL | 1× |
| Direkte Ensiemmengsel | 1μL | |
| Voorwaartse onderlaag (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Reverse Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Sonde (4 μM) | 1μL | 200nM |
| Sjabloon (RNA of lysaat) | X μL | |
| 20×ROX Verwysingskleurstof | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Totale volume | 20μL |
C: Stel die RT-qPCR reaksie program
Tafel 2 : RT-qPCR reageeron program instelling (vir voorbeeld: twee-stap metode)
| Stap | Temperatuur | Tyd | Siklusse | Inhoud | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Omgekeerde transkripsie |
| 2 | 95℃ | 1 min | 1 | Pre-denaturasie | |
| 3 | 95℃ | 10 sek | 40-45 | Denaturasie | |
| 60 ℃ | 30 sek. 2* | Uitgloeiing/Uitbreiding | |||
Berging en raklewe
-Die kit moet by -20 gestoor word± 5℃.Die geldigheidstydperk is 12 maande.
-Vermy herhaalde vries-ontdooi-siklusse (<5 siklusse).
