ForeDirect RT-qPCR Kit
Beskrywing
ForeDirect RT-qPCR Kit is ontwerp vir RNA direkte intydse amplifikasie vanaf depperversamelings sonder RNA-suiweringsprosesse.Hierdie stel voltooi die qRT-PCR-siklusse binne een uur.Die ensiemmengsel is 'n geoptimaliseerde mengsel van Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA-polimerase, RNase-inhibeerder.Die reaksiebuffer bevat al die vereiste komponente, insluitend geoptimaliseerde bufferkomponente, Mg2+, dUTP en dNTP's.
Spesifikasies
100T
Kit komponente
Nukleïensuur vrystellingsmiddel |
RNA-beskermer |
2× RT-qPCR-buffer |
Ensiemmengsel (Taq&M-MLV) |
Instruksies |
PCR Aansoek
1. Sodra die PCR-reaksiebuise kortliks gesentrifugeer is, plaas dit in die monstertenk van die amplifikasie-instrument.
2. Termiese protokol
Stap | Temperatuur | Tyd | Siklusse | |
1 | Omgekeerde transkripsie | 50 ℃ | 15 min | 1 |
2 | Pre-denaturasie | 95℃ | 1 min | 1 |
3 | Denaturasie | 95℃ | 10 sekondes | 42 |
4 | Uitgloeiing/Uitbreiding | 60 ℃ | 30 sekondes |
Let wel:Fluorescerende sein is onmiddellik na die verlengingstap van elke siklus opgespoor.
3. Nadat u dit gestel het, stoor die lêer en hardloop die reaksieprogram.
Bedryfstappe
Voor reagensvoorbereiding moet al die reagense in die stel by kamertemperatuur ontdooi word en liggies gemeng word.
Reagens voorbereiding
1. Berei die Nukleïensuurvrystellingmengsel voor
Komponent | Volume per monster of kontrole |
Nukleïensuur vrystellingsmiddel | 5 μL |
RNA-beskermer | 0,5 μL |
2. Berei die reaksiemengsel voor
Komponent | Volume per monster of kontrole |
2× RT-qPCR-buffer | 15 μL |
Ensiemmengsel (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
Primers en Probes | 1μL |
Berging en raklewe
-Die kit moet by -20 gestoor word± 5℃.Die geldigheidstydperk is 12 maande.
-Vermy herhaalde vries-ontdooi-siklusse (<5 siklusse).